COMPARATIVE INVESTIGATION OF THE EFFECTS OF SCORPION VENOM ON APOPTOSIS IN A549 LUNG CANCER CELL LINES
II. Uluslararası Bilim ve İnovasyon Kongresi, 25-27 Haziran 2021, TÜRKİYE, İstanbul, Türkiye, 25 - 27 Haziran 2021, ss.26-27, (Özet Bildiri)
- Yayın Türü: Bildiri / Özet Bildiri
- Basıldığı Şehir: İstanbul
- Basıldığı Ülke: Türkiye
- Sayfa Sayıları: ss.26-27
- Ankara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi Adresli: Evet
Özet
Özet
Prevelansı giderek artan kanser hastalığının tedavisindeki açıklığı gidermek için günümüzde çok çeşitli
araştırmalar yapılmaktadır. Biyoaktif bileşenlerin kanser hücreleri üzerindeki apoptozis etkisinin araştırıldığı
çalışmalar son yıllarda dikkat çekmiştir. Kanser tedavisinde esas hedef apoptoz ve otofajinin
indüklenmesidir. Bu çalışmayı A549 kanser hücre hatlarına uygulanan akrep zehirinin apoptoz ve otofaji ile
ilgili bazı genlerin eksperesyonları hipotezini varsayarak tasarladık. Öncelikle ham akrep zehiri değişik
konsantrasyonlarda dilüe edilerek A549 kanser hücre hatlarına uygulandı. MTT ile hücre ölümü tespit edildi
ve IC50 değeri hesaplandı. Real-time PCR testi ile hücre ölüm tipine ait gen ekspresyonlarını tespit etmek
amacı ile Kaspaz 3, Bcl-2, Bax, Atg5 genleri ve housekeeping geni ile β aktin genlerinin gen transkripsiyon
düzeyleri belirlendi. Atg5, BCL, BAX ve CASP3 ekspresyonları kantifikasyonu ACTB geni referans olarak
kullanılıp kontrol grubuna göre normalize edilmiştir. Relatif kantifikasyon hesaplaması olan “2-∆∆CT
Yöntemi” kullanılmıştır. Çalışmamızın sonucuna göre Kaspaz-3 geni ekspresyon düzeyi kontrol grubuna göre biraz düserken; Bax geni ekspresyon düzeyi kontrol grubuna kıyasla yaklaşık 3 kat arttığı belirlenmiştir.
Bcl-2 gen ekspresyon düzeyi kontrol grubuna göre artış göstermiştir. Atg5 geni ekspresyon düzeyi ise
kontrol grubuna kıyasla düşüş göstermiştir.
Anahtar Kelimeler: A549 Hücre Hattı, Apoptoz, Akrep Zehiri, RT-PCR.
Abstract
Various studies are currently being conducted to address the gap in the treatment of cancer, the prevalence of
which is increasing. Studies investigating the apoptosis effect of bioactive components on cancer cells have
attracted attention in recent years. The main target in cancer treatment is the induction of apoptosis and
autophagy. We designed this study by hypothesizing the expression of some genes related to apoptosis and
autophagy by scorpion venom applied to A549 cancer cell lines. First, crude scorpion venom was diluted at
different concentrations and applied to A549 cancer cell lines. Cell death was detected by MTT and the IC50
value was calculated. With real-time PCR test, gene transcription levels of Caspase 3, Bcl-2, Bax, Atg5
genes and housekeeping gene and β actin genes were determined in order to determine gene expressions of
cell death type. Quantification of Atg5, BCL, BAX and CASP3 expressions was normalized to the control
group using the ACTB gene as a reference. The “2-∆∆CT Method”, which is a relative quantification
calcula1tion, was used. According to the results of our study, the expression level of Caspase-3 gene was
slightly lower than the control group; It was determined that Bax gene expression level increased
approximately 3 times compared to the control group. Bcl-2 gene expression level increased compared to the
control group. Atg5 gene expression level decreased compared to the control group.
Keywords: A549 Cell Line, Apoptosis, Scorpion Venom, RT-PCR.