Objective: Colon cancer is the most aggressive type of cancer and is characterized by a inefficient prognosis in advanced stages due to inadequate treatment. Rosmarinic acid (RA) has been shown to be effective against lesions in various cancers, including colon, pancreatic, prostate, liver and multiple myeloma. In our study, we aimed to investigate the effect of rosmarinic acid on lipopolysaccharide (LPS)-induced cell damage and autophagy in colorectal cancer cells. Method: The human colon cancer cell line Caco-2 (HTB-37) was used in our study. 4 groups were formed: Control, LPS, RA and LPS+RA. For Caco-2, an RA dose of 200 μg/ml and an LPS dose of 10 μg/ml were used. After the Caco-2 cell lines were cultured, immunohistochemical analyzes were performed to determine the cellular localizations of Beclin-1, p62 and LC3 proteins. Western blot analyzes were performed to determine the expression of these proteins in the autophagic pathway. Results: Autophagic protein expression was found to be higher in the LPS-damaged group compared to the control group (p<0,05). It was found to be statistically significant in the LPS+RA group compared to the other groups (p<0,05). Conclusion: As a result, we found that when LPS-induced damage was induced in Caco-2 colon cancer cells, there was a decrease in the expression of important Beclin 1, p62 and LC3 proteins in the autophagy pathway, but an increase in their protein expression in the rosmarinicacid-treated group. In conclusion, with this study we suggest that more comprehensive studies should be conducted to determine the clinical effect of rosmarinic acid against the degradation of key proteins in the autophagy pathway in colorectal cancer cells.
Amaç: Kolon kanseri en agresif kanser türüdür ve tedavilerin yetersiz olmasından kaynaklı ileri aşamalarda kötü prognoz ile karakterizedir. Rosmarinik asit (RA) kolon, pankreas, prostat, karaciğer ve multipl miyelom dahil olmak üzere çeşitli kanserlerdeki lezyonlara karşı etkili olduğu kanıtlanmıştır. Çalışmamızda lipopolisakkarit (LPS) ile oluşturulan hücresel hasar ve otofaji üzerine rosmarinik asitin kolon kanseri hücrelerine etkisini araştırmayı amaçladık. Yöntem: Çalışmamızda insan kolon kanseri Caco-2 (HTB-37) hücre hattı kullanıldı. Kontrol, LPS, RA ve LPS+RA olmak üzere 4 grup dizayn edildi. Caco-2 için 200 μg/mL RA dozu ve LPS dozu 10 μg/ml kullanıldı. Caco-2 hücre hatları kültüre edildikten sonra Beclin-1, p62 ve LC3 proteinlerinin hücresel lokalizasyonlarını belirlemek için immünohistokimyasal analizler gerçekleştirildi. Otofajik yolaktaki bu proteinlerin ifadesini belirlemek için western blot analizleri yapıldı. Bulgular: LPS hasarı oluşturulan grupta kontrol grubuna göre otofajik protein ifadesi yüksek bulunmuştur (p<0,05). LPS+RA verilen grupta diğer gruplar ile karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlı fark bulunmuştur (p<0,05). Sonuç: Sonuç olarak, Caco-2 kolon kanser hücrelerinde LPS ile hasar oluşturulduğunda otofaji yolağındaki Beclin 1, p62 ve LC3 önemli proteinlerin ifadelerinde azalma ancak rosmarinik asit ile tedavi edilen grupta protein ifadelerinde artış olduğunu tespit ettik. Bu çalışma ile rosmarinik asitin kolon kanseri hücrelerinin otofaji yolağında önemli proteinlerin degredasyonuna karşı klinik etkilerinin tespit edilebilmesi için daha kapsamlı çalışmaların yapılması gerektiğini önermekteyiz.
